造血干细胞是骨髓中重要的细胞,它能够分化发展成为各种血液细胞,例如红细胞、白细胞、血小板、淋巴细胞等。造血干细胞功能障碍与多种血液疾病有关,例如再生障碍性贫血,特发性血小板减少、白细胞减少等。
重庆医科大学干细胞与组织工程研究室运用三丁基过氧化氢(t-BHP)制造动物的衰老模型,然后给予人参达玛烷皂苷Rg1干预。发现Rg1处理后,衰老相关基因/蛋白的表达下降,造血祖细胞的集落数目增加。这项研究的意义是:人参达玛烷皂苷Rg1能够预防造血干细胞的衰老,对由于造血干细胞增生障碍引起的各种疾病具有一定的治疗意义。
该项研究发表在:中国中药杂志 2011, 36(5)。
题目:人参皂苷Rg1延缓造血干细胞衰老与p16INK4a表达关系的研究
目的: 探讨人参皂苷单体Rg1延缓造血干细胞(HSC)衰老与p16INK4a的表达调控关系,为寻找延缓HSC衰老途径提供理论和实验依据.
方法: 免疫 磁性分选法分离纯化Sca-1+HSC后分组.对照组常规培养;衰老组运用三丁基过氧化氢(t-BHP)复制衰老模型;Rg1组在对照组基础上加入 10μmol·L-1Rg1共培养;Rg1延缓衰老组给予10μmol·L-1Rg1预处理后,复制衰老模型;Rg1治疗衰老组,衰老模型复制后,给予 10μmol·L-1Rg1抗衰老处理.衰老相关β半乳糖苷酶(SA-β-gal)细胞化学染色、流式细胞术分析细胞周期和造血祖细胞混合集落(CFU- Mix)培养确定Rg1延缓或治疗Sca-1+HSC衰老生物学作用.RT-PCR及Western blotting检测衰老相关基因pl6INK4amRNA及蛋白的表达.
结果: Rg1延缓衰老组,Rg1治疗衰老组与衰老组相比,SA-β-gal染色 阳性细胞百分比降低,G1期细胞比例下降,生成造血祖细胞混合集落数增加,p16INK4amRNA及蛋白的表达下降;Rg1延缓衰老组的SA-β- gal染色阳性细胞百分比、G1期比例、pl6INK4amRNA及蛋白的表达均低于Rg1治疗衰老组,形成造血祖细胞混合集落数高于Rg1治疗衰老组.
结论: Rg1具有延缓和治疗Sca-1+HSC衰老的作用,Rg1延缓衰老比治疗衰老效果更好.Rg1可能通过调控p16INK4a的表达发挥其对抗t- BHP诱导的Sca-1+HSC衰老的作用.